生物安全柜和超凈工作臺(tái)的區(qū)別
生物安全柜
生物安全柜是微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、基因重組、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、生物制品等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)的一種安全設(shè)備,也是生物安全領(lǐng)域的一級(jí)防護(hù)屏障。 實(shí)驗(yàn)室生物安全最基本的安全防護(hù)設(shè)備。
2003年SARS爆發(fā)和高致病性禽流感的發(fā)生,特別是2003-2004年發(fā)生的三起SARS實(shí)驗(yàn)室感染事故后,政府和廣大科研人員對(duì)生物危害有了更深的認(rèn)識(shí)。 2004年國(guó)家頒布國(guó)424號(hào)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室過濾規(guī)程》和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2004,明確指出生物安全柜是微生物實(shí)驗(yàn)室的主要安全設(shè)備 . 對(duì)保護(hù)實(shí)驗(yàn)室工作人員至關(guān)重要。 規(guī)范化、規(guī)范化地使用生物安全柜,可以為人員、環(huán)境、檢測(cè)樣品提供保護(hù)。 已開發(fā)的生物安全柜分為I類柜、II類柜和III類柜三類,可滿足各種實(shí)驗(yàn)和臨床需要。
生物安全柜的功能、用途、結(jié)構(gòu)、排氣系統(tǒng)和/或送風(fēng)系統(tǒng)(高效微??諝膺^濾器),以及實(shí)驗(yàn)室選用生物安全柜的基本原則、安裝原則和要求、實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程 ,以及日常維護(hù)要求等等。 這些內(nèi)容是在實(shí)際使用和操作生物安全柜時(shí)必須掌握的知識(shí)。
大部分實(shí)驗(yàn)室工作人員對(duì)生物安全柜的性能、選型、操作和維護(hù)知識(shí)知之甚少,經(jīng)?;煜锇踩窈统瑑艄ぷ髋_(tái)這兩種設(shè)備。 其實(shí),兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。 生物安全柜是一種負(fù)壓凈化工作臺(tái)。 生物安全柜的正確操作,可以完全保護(hù)工作人員、被檢樣品,防止交叉污染的發(fā)生; 而超凈工作臺(tái)只是一種保護(hù)操作對(duì)象但不保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的潔凈工作臺(tái)。 因此,在微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中,應(yīng)選用生物安全柜代替超凈工作臺(tái)。
生物安全柜設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和檢測(cè)驗(yàn)證中使用的各種術(shù)語(yǔ)和定義、分類、設(shè)計(jì)、結(jié)構(gòu)和性能的基本要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、標(biāo)簽和說明、包裝、運(yùn)輸和貯存要求、檢測(cè) 檢定方法、檢測(cè)儀器的選擇和校準(zhǔn)、產(chǎn)品出廠檢驗(yàn)要求、現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)要求等。
生物安全柜的選擇生物安全柜(Biological safety cabinets,BSCs)用于保護(hù)操作者自身、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和實(shí)驗(yàn)材料,旨在避免接觸上述操作過程中可能產(chǎn)生的傳染性氣溶膠和飛濺物。
WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》指出,生物安全柜可有效減少氣溶膠暴露引起的實(shí)驗(yàn)室感染和培養(yǎng)物交叉污染。 生物安全柜還可以保護(hù)工作環(huán)境。
事實(shí)上,生物安全柜更側(cè)重于保護(hù)操作人員和環(huán)境,防止操作中病原微生物的傳播造成人身傷害和環(huán)境污染。
根據(jù)生物安全防護(hù)等級(jí)的不同,生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三種。 I 級(jí)生物安全柜保護(hù)工作人員和環(huán)境,但不保護(hù)樣品。 其氣流原理與實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)柜基本相同,只是在排氣口安裝了HEPA過濾器,對(duì)外部排氣流進(jìn)行過濾,防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。 一級(jí)生物安全柜本身沒有風(fēng)扇,靠外通風(fēng)管道中的風(fēng)扇帶動(dòng)空氣流動(dòng)。 由于不能保護(hù)柜內(nèi)產(chǎn)品,目前使用較少。
II類生物安全柜是目前使用最廣泛的一類安全柜。 根據(jù)《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》,二級(jí)生物安全柜按進(jìn)風(fēng)速度、排氣方式、循環(huán)方式分為4個(gè)等級(jí):A1型、A2型、 B1型和B2型。 所有 II 類生物安全柜都為工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品提供保護(hù)。
A1型安全柜前窗的最小或?qū)崪y(cè)平均風(fēng)速至少為0.38m/s。 無內(nèi)部再循環(huán)氣流,100%的空氣通過排氣口過濾出去。
A2安全柜前窗的最小或?qū)崪y(cè)平均風(fēng)速至少為0.5m/s。 70%的空氣通過HEPA過濾器再循環(huán)到工作區(qū),30%的空氣通過排氣口過濾出去。
II類B型生物安全柜都是連接排氣系統(tǒng)的安全柜。 與安全柜排風(fēng)管相連的風(fēng)機(jī)連接應(yīng)急電源,以在停電時(shí)保持安全柜內(nèi)的負(fù)壓,防止危險(xiǎn)氣體泄漏到實(shí)驗(yàn)室。 其前窗氣流速度應(yīng)至少為 0.5m/s (100fpm) 最小值或測(cè)量平均值。
B1型70%的氣體通過排氣口的HEPA過濾器排出,30%的氣體通過供氣口的HEPA過濾器再循環(huán)到工作區(qū)。
B2型是100%全排安全柜,無內(nèi)循環(huán)氣流,可同時(shí)提供生物和化學(xué)安全控制,可操作揮發(fā)性化學(xué)品和揮發(fā)性核放射性物質(zhì)作為微生物實(shí)驗(yàn)的添加劑。
III類生物安全柜專為生物安全防護(hù)等級(jí)為4級(jí)的實(shí)驗(yàn)室而設(shè)計(jì),柜體完全密閉。 工作人員通過與柜體相連的手套進(jìn)行操作,俗稱手套箱(Golve box)。 門傳遞箱進(jìn)出安全柜,確保不受污染,適用于高危生物實(shí)驗(yàn),如SARS、埃博拉病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)等。
根據(jù)生物安全柜強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY0569-2005生物安全柜》,只有獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的第三類醫(yī)療器械注冊(cè)證的產(chǎn)品才能 真正保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和操作樣品。
潔凈工作臺(tái)
LAMINAR FLOW CABINET (Clean Benches),專為保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料而設(shè)計(jì),將空氣通過風(fēng)機(jī)吸入預(yù)過濾器,通過靜壓箱進(jìn)入高效過濾器,將過濾后的空氣垂直或水平過濾的狀態(tài) 氣流送出,使作業(yè)區(qū)達(dá)到100級(jí)潔凈度,保證環(huán)境潔凈度的生產(chǎn)要求。
超凈工作臺(tái)只能保護(hù)樣品,不能保護(hù)操作人員。
從潔凈度級(jí)別來看,生物安全柜也比超凈工作臺(tái)更先進(jìn)。
超凈工作臺(tái)的優(yōu)點(diǎn)是操作方便舒適,相對(duì)舒適,工作效率高,準(zhǔn)備時(shí)間短,開機(jī)10多分鐘即可操作,基本可以隨時(shí)使用。 在工廠生產(chǎn)中,接種工作量很大,需要長(zhǎng)時(shí)間工作時(shí),超凈臺(tái)是一種理想的設(shè)備。
超凈工作臺(tái)由功率約145-260W的三相電機(jī)驅(qū)動(dòng)。 空氣通過特殊微孔泡沫片組成的“超級(jí)過濾器”吹出,形成連續(xù)無塵的環(huán)境。 細(xì)菌超凈空氣層流,即所謂“高效特種空氣”,去除粉塵、真菌和大于0.3μm的細(xì)菌孢子。 超凈空氣流速為24-30m/min,足以防止附近空氣可能擾動(dòng)造成的污染,且此流速不會(huì)妨礙酒精燈、本生燈或電子燈的使用 火焰消毒器 儀器等的燃燒消毒。
工作人員在這樣的無菌條件下操作,以確保無菌材料在轉(zhuǎn)移和接種過程中不被污染。 然而,如果在操作中途停電,暴露在未經(jīng)過濾的空氣中的材料將不可避免地受到污染。 這時(shí)候要趕快結(jié)束工作,在瓶子上做好記號(hào)。 如果里面的材料處于繁殖期,以后就不再用于繁殖,轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)。 如果是一般的制作材料,完全可以舍棄,因?yàn)樗鼧O其豐富。 如果是在生根過程中,可以留著以后種植。
超凈工作臺(tái)的供電多采用三相四線制,其中一根與機(jī)殼相連,應(yīng)牢固連接地線,其余三根線均為相線, 工作電壓為380V。 三線連接電路中有一定的順序。 如果線頭連接錯(cuò)誤,風(fēng)扇將反轉(zhuǎn)。 此時(shí)聲音正?;蚵杂挟惓?。 如果超凈臺(tái)正面沒有風(fēng),可以用酒精燈的火焰觀察動(dòng)靜。 不宜久試,應(yīng)及時(shí)停藥。 對(duì)于電源,只要將任意兩相線頭對(duì)調(diào)后再接,即可解決。
如果三相線只接兩相,或三相其中一相接觸不良,機(jī)器聲音會(huì)很不正常,應(yīng)立即切斷電源仔細(xì)檢查,否則電機(jī) 會(huì)被燒毀。 這些常識(shí)在開始使用超凈工作臺(tái)時(shí)就應(yīng)該向工作人員解釋清楚,以免發(fā)生不該造成的事故和損失。
超凈工作臺(tái)進(jìn)風(fēng)口在背面或正面下方。 金屬網(wǎng)罩內(nèi)有普通泡沫塑料片或無紡布,可阻擋大顆?;覊m。 應(yīng)經(jīng)常檢查、拆卸和清洗。 如果發(fā)現(xiàn)泡沫塑料老化,應(yīng)及時(shí)更換。 除進(jìn)風(fēng)口外,如有漏氣孔,應(yīng)將其堵嚴(yán),如粘膠帶、塞棉、粘膠紙等。工作臺(tái)正面金屬網(wǎng)罩內(nèi)有超濾器, 超級(jí)過濾器也可以更換。 如果因長(zhǎng)期使用而被塵粒堵塞,風(fēng)速下降,不能保證無菌操作,可以更換新的。
超凈臺(tái)的使用壽命與空氣的潔凈度有關(guān)。 在溫帶地區(qū),超凈工作臺(tái)可用于一般實(shí)驗(yàn)室。 但在熱帶或亞熱帶地區(qū),由于大氣中花粉較多或粉塵較多,超凈工作臺(tái)應(yīng)放置在雙開門的室內(nèi)較好。 利用。 超凈工作臺(tái)進(jìn)風(fēng)罩在任何情況下都不應(yīng)朝向敞開的門窗,以免影響過濾器的使用壽命。
無菌室應(yīng)定期用70%酒精或0.5%苯酚噴灑降塵消毒,用2%溴潔爾明擦拭臺(tái)面和器具,也可用70%酒精,并用福爾馬林40%甲醛加少量 適量的高錳酸鉀定期密閉熏蒸,結(jié)合每次開啟15分鐘以上的紫外線殺菌燈等消毒殺菌方式,使無菌室始終保持高度無菌狀態(tài)。 接種箱內(nèi)部還應(yīng)裝有紫外線燈。 使用前先開燈15分鐘以上照射殺菌。 然而,細(xì)菌仍然存在于無法照射的區(qū)域。
紫外線燈在長(zhǎng)時(shí)間開啟時(shí),可以激發(fā)空氣中的氧分子,形成臭氧分子。 這種氣體成分具有很強(qiáng)的殺菌作用,可以對(duì)沒有被紫外線直接照射到的角落產(chǎn)生殺菌作用。 因臭氧對(duì)健康有害,進(jìn)入作業(yè)前應(yīng)關(guān)閉紫外線燈,關(guān)燈十多分鐘后方可進(jìn)入。
超凈工作臺(tái)上也可吊裝紫外線燈,但應(yīng)安裝在燈罩外,燈管應(yīng)錯(cuò)開平行排列,以免工作時(shí)妨礙照明。 把紫外燈放在燈罩的玻璃板里面是沒有用的,因?yàn)樽贤夤獠荒艽┩覆A?,而且它的燈管是石英玻璃,不是硅酸鹽玻璃。
接種室盡量簡(jiǎn)單,不得放置與本室工作無直接關(guān)系的物品,以保持無菌狀態(tài)。 接種室內(nèi)的空氣應(yīng)與外界空氣絕對(duì)隔離,預(yù)留的通風(fēng)孔應(yīng)盡可能密閉。 上下橫梁可設(shè)通風(fēng)孔,橫梁面積宜稍大。 它需要覆蓋4層紗布,以進(jìn)行簡(jiǎn)單的灰塵過濾。 經(jīng)過一天的工作,可以打開窗戶充分通風(fēng),然后密封。 總之,一定要干凈、無塵、無菌,空氣要清新,適合工作。 蓋在通風(fēng)窗上的紗布要勤換洗。 然而,上述措施只是理想的設(shè)計(jì)方案,往往難以全面實(shí)施。 事實(shí)上,只要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)程,敞開門窗的房間有超凈臺(tái)保護(hù),接種的污染率還是可以控制在生產(chǎn)中可以接受的范圍內(nèi)等級(jí)。
超凈工作臺(tái)的使用管理
(1) 每次使用超凈工作臺(tái)時(shí),實(shí)驗(yàn)者應(yīng)先打開超凈工作臺(tái)上的紫外線燈,紫外線照射20分鐘后使用。
(2)打開超凈工作臺(tái)工作電源,關(guān)閉紫外線燈,用75%酒精或0.5%過氧乙酸對(duì)工作臺(tái)進(jìn)行噴灑消毒。
(3)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)按照無菌操作規(guī)程進(jìn)行操作。
(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用消毒液擦拭工作臺(tái)面,關(guān)閉工作電源,重新開啟紫外燈照射15分鐘。
(5)本單位出現(xiàn)故障,應(yīng)立即通知?jiǎng)游飳?shí)驗(yàn)室,經(jīng)專業(yè)人員檢驗(yàn)合格后方可繼續(xù)使用。
(6) 實(shí)驗(yàn)者應(yīng)保持房間整潔。
(7)超凈工作臺(tái)濾材每2年更換一次,并做好更換記錄。